胶质母细胞瘤（GBM）是成人最常见的中枢神经系统恶性肿瘤之一，其中MGMT启动子未甲基化的患者因肿瘤高表达MGMT修复蛋白，对替莫唑胺化疗不敏感，中位总生存期通常不足20个月。近年来，免疫检查点抑制剂在多数GBM临床试验中未能显著改善生存，可能与肿瘤内异质性高、免疫抑制微环境、低突变负荷及T细胞功能障碍有关。

新抗原疫苗作为一种个性化免疫策略，能诱导特异性T细胞应答。然而，既往肽疫苗受限于抗原数量、生产成本和制造时间。DNA疫苗平台可编码更多新抗原，具备更高灵活性和可扩展性。

基于此背景，来自美国华盛顿大学医学院Siteman癌症中心的研究团队，牵头启动了一项开放标签、单臂I期临床研究（GT-20试验，NCT04015700）——旨在评估个性化多价新抗原DNA疫苗（GNOS-PV01）在新诊断的MGMT启动子未甲基化IDH野生型GBM患者术后放疗后使用的安全性、可行性、免疫原性及初步临床活性。最新研究成果于2026年5月12日发表在《Nature Cancer》（IF：28.5）（doi：10.1038/s43018-026-01163-w）。

研究纳入9名新诊断的MGMT启动子未甲基化IDH野生型GBM患者。在初次手术中，采集3–4个空间分布不同的肿瘤区域进行全外显子和转录组测序，结合pVAC-seq流程预测新抗原，每位患者疫苗纳入17–40个新抗原（中位36个）。疫苗为DNA质粒，编码串联新抗原表位，每剂1 mg，联合1 mg IL-12 DNA佐剂（INO-9012），通过电穿孔肌注给药。患者完成放疗后开始疫苗接种：前9周每3周一次（初免），之后每9周一次（加强），直至进展或不耐受。主要终点为安全性与可行性，次要终点包括免疫原性、6个月无进展生存率和12个月总生存率。

研究结果显示，在安全性方面，所有9名患者均接受了疫苗，未发生意外毒性或剂量限制性毒性。绝大多数不良事件为1级注射部位反应，仅一例出现3级脑水肿，经贝伐珠单抗控制后继续接种。可行性方面，从放疗结束至首次接种的中位时间为10周，从手术至首次接种为22周，提示生产流程需进一步优化以提高时效性。在疗效上，尽管3例患者在首次接种前已出现影像学进展，整体人群的6个月无进展生存率和12个月总生存率均为66.7%。中位无进展生存期为8.5个月，中位总生存期为16.3个月，24个月生存率为33%，高于历史对照的10–15%。与同期未入组的5例接受标准放化疗的未甲基化患者相比，疫苗组呈现生存优势，但未达统计学显著性。

免疫原性分析显示，在7例可评估患者中，疫苗诱导了CD8+和CD4+ T细胞中CD69、CD137、PD-1及Ki67的显著上调。IFNγ ELISpot检测证实6例患者（除1例使用地塞米松者）出现新抗原特异性T细胞反应，且反应可持续至接种后46周。单细胞TCR测序和单核RNA测序进一步证实，疫苗可诱导新T细胞克隆进入肿瘤微环境，并在长期生存者（患者8）中观察到疫苗接种2年后出现新的肿瘤特异性T细胞克隆扩增，伴随影像学假性进展。值得注意的是，地塞米松使用（如患者2）严重削弱疫苗诱导的免疫应答，并导致肿瘤细胞HLA及B2M表达下调，提示糖皮质激素可能通过抑制抗原呈递和T细胞功能影响疗效。相比之下，患者9在疫苗接种后出现CD8+ T细胞浸润增加，后续接受PD-1阻断治疗后出现了假性进展，提示疫苗可为后续免疫检查点抑制剂治疗“预激活”微环境。

研究共同通讯作者、华盛顿大学医学院Tanner M. Johanns教授表示，“研究结果令我们极为鼓舞，利用个体化治疗性DNA癌症疫苗平台，为正在与这种疾病作斗争的患者的生活带来积极影响，实在令人振奋。这类疫苗在胶质母细胞瘤治疗中尚属首次。此外，基于这一个性化平台的联合治疗方案也正在华盛顿大学进行研究中，以测试能否进一步改善患者预后。”

据悉，研究下一步将在更大规模的患者群体中评估该疫苗的疗效，并将治疗扩展到所有类型的胶质母细胞瘤。团队的目标是提升疫苗的免疫应答效果，确保更多患者从中获益。