奋乃静和替莫唑胺的协同组合可抑制患者来源的胶质母细胞瘤肿瘤球

Synergistic combination of perphenazine and temozolomide suppresses patient-derived glioblastoma tumorspheres

Jun Pyo Hong and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 3, March 2025, Pages 654–667, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae211

编译：郜彩斌 康福

胶质母细胞瘤(GBM)是一种原发性恶性脑肿瘤，即使采用放疗和化疗等标准治疗，预后也很差。在这项研究中，我们探讨了多巴胺受体D2/3 (DRD2/3) 拮抗剂奋乃静 (PER) 和GBM标准治疗药物替莫唑胺 (TMZ) 在患者来源的人类GBM肿瘤球 (TS) 中的协同组合的抗癌作用。通过测量细胞活力、ATP、细胞干性、侵袭性和细胞凋亡来评估PER和TMZ组合在GBM TS中的生物学效应。使用蛋白质印迹和RNA测序分析蛋白质和mRNA表达的变化。使用小鼠原位异种移植模型在体内评估PER和TMZ的共同给药。Severance数据集显示，GBM患者肿瘤组织中DRD2和DRD3的表达高于无肿瘤皮层。CRISPR/Cas9在患者来源的人类GBM TS中敲除DRD2/3可抑制细胞生长和ATP产生。与单一治疗组相比，PER和TMZ联合治疗对细胞活力和ATP测定产生了优异的效果。流式细胞术、蛋白质印迹和RNA测序证实联合治疗后GBM TS中细胞凋亡升高。此外，PER和TMZ的组合下调了与细胞干性和侵袭性相关的蛋白质和mRNA的表达。体内评估表明，PER和TMZ联合使用延长了小鼠原位异种移植模型的存活期。PER和TMZ的协同组合有可能成为GBM的新型联合治疗策略。

胶质瘤-星形胶质细胞连接蛋白43通过激活E2 F1/ERCC 1轴赋予替莫唑胺抗性

Glioma–astrocyte connexin43 confers temozolomide resistance through activation of the E2F1/ERCC1 axis

Yanping Gui and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 3, March 2025, Pages 711–726, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae237

编译：程传东 陈一楠

替莫唑胺（Temozolomide, TMZ）是胶质瘤的标准化疗药物，但耐药性的存在严重限制了其疗效。既往研究表明，胶质瘤相关星形胶质细胞（Tumor-Associated Astrocytes, TAAs）通过多种机制促进肿瘤进展，并影响TMZ耐药。本研究揭示了Cx43（Connexin43）在胶质瘤微环境中的关键作用，具体为Cx43通过β-Catenin/miR-205-5p/E2F1/ERCC1轴增强TMZ耐药性。研究探索了靶向Cx43作为抗耐药策略的可行性。

研究团队在临床胶质瘤样本、细胞系和小鼠模型中评估了Cx43的表达水平及其对TMZ敏感性的影响。通过基因敲除、药物抑制和生化分析（包括质谱、ChIP实验等），解析了Cx43介导TMZ耐药的分子机制。结果显示，Cx43在胶质瘤组织中的表达量显著上调，并与患者较差的预后相关。共培养实验显示，星形胶质细胞可诱导胶质瘤细胞Cx43表达，并增强其抗TMZ能力。Cx43上调诱导β-Catenin在胶质瘤细胞表面的积累，使其滞留于细胞膜，减少核内转位，并抑制miR-205-5p的表达。E2F1上调后直接促进DNA损伤修复蛋白ERCC1的转录，增强胶质瘤细胞的TMZ耐受能力。通过基因敲除Cx43或使用其抑制剂，可显著增强TMZ诱导的细胞凋亡，并使小鼠模型的生存期延长。

本研究首次明确了Cx43通过β-Catenin/miR-205-5p/E2F1/ERCC1轴促进TMZ耐药的新机制，并提出靶向Cx43可能是一种增强TMZ治疗效果的策略。然而，Cx43是否影响其他耐药通路，以及如何高效靶向Cx43仍需进一步研究。

一种新型核RNA HSD52支架NONO/SFPQ复合物调节DNA损伤修复以促进替莫唑胺耐药性的研究

A novel nuclear RNA HSD52 scaffolding NONO/SFPQ complex modulates DNA damage repair to facilitate temozolomide resistance

Nan Sun and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 4, April 2025, Pages 963–978, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae272

编译：张泽书 郜彩斌

胶质母细胞瘤（GBM）是最常见的恶性原发性脑肿瘤。替莫唑胺（Temozolomide, TMZ）仍然是临床治疗新诊断的GBM的一线化疗药物。然而，治疗的主要障碍是对TMZ化疗的耐药性，这严重影响了患者的预后。因此，迫切需要研究TMZ耐药的潜在机制，并确定临床治疗GBM的潜在致敏靶点。非POU结构域的八聚体结合蛋白（NONO）和富含脯氨酸/谷氨酰胺的剪接因子（SFPQ）是参与基因组稳定性和基因调控的多功能核蛋白。然而，NONO和SFPQ在GBM抗TMZ中的具体作用仍有待探索。本研究对TMZ抗性细胞和亲本细胞进行RIP芯片和RNA微阵列检测，以获得HSD52。通过体外测定、颅内异种移植物和 GBM类器官模型研究了HSD52对TMZ耐药性的影响。通过DNA甲基化芯片、RNA免疫沉淀、RNA Pull-down测定等探索了潜在机制。纳入GBM临床样本以研究HSD52的临床意义。结果发现了这种新的非编码RNA--HSD52，它在TMZ耐药的GBM中高表达，并促进NONO与SFPQ之间的相互作用。H3泛素化衰减和DNA甲基转移酶1 (DNMT1)募集减少通过DNA低甲基化增加HSD52转录。HSD52与UFM1特异性连接酶1 (UFL1) mRNA形成RNA双链，从而促进NONO/SFPQ复合物结合UFL1 mRNA并增强其稳定性，进而通过激活毛细血管扩张性共济失调突变信号通路（ATM信号通路）促进TMZ耐药。在体内异种移植物和GBM类器官模型中，我们用TMZ治疗敲除HSD52后的模型，发现肿瘤生长显著受到抑制。在GBM临床样本中，HSD52在GBM恶性进展和GBM的TMZ耐药中扮演关键因素。结论：HSD52通过调控NONO/SFPO复合物和ATM通路驱动TMZ耐药，是克服GBM化疗耐药的新潜在靶点。

线粒体丙酮酸载体在替莫唑胺和放射治疗的胶质母细胞瘤中抑制分化的疾病阶段特异性作用

Disease stage-specific role of the mitochondrial pyruvate carrier suppresses differentiation in temozolomide and radiation-treated glioblastoma 

Emma Martell and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 5, May 2025, Pages 1193–1209, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf008

编译：康福 郜彩斌

线粒体丙酮酸载体（MPC）是连接糖酵解和线粒体代谢的中心代谢管道，在能量产生中起重要作用。然而，MPC在癌症中的作用存在争议。特别地，MPC在标准替莫唑胺（TMZ）和放射疗法（RT）后胶质母细胞瘤（GBM）疾病进展中的重要性仍然未被探索。利用TMZ-RT治疗GBM的体外和体内患者衍生模型，我们使用最先进的分子、代谢和功能测定来表征MPC丰度和下游代谢后果的时间动态。文章的研究揭示了MPC在疾病不同阶段的特异性作用：在治疗后的胶质母细胞瘤（GBM）中，而非未经治疗的肿瘤中，MPC作为核心代谢调控因子抑制细胞分化。时间序列分析显示，随着MPC丰度的持续增加，患者GBM样本中的线粒体代谢活动呈现动态增强趋势。值得注意的是，尽管整体线粒体代谢水平升高，但治疗后GBM细胞的乙酰辅酶A生成却减少，这种现象通过MPC依赖机制阻碍组蛋白乙酰化并抑制神经分化基因表达。最后，这些发现的临床应用价值体现在：使用可穿透血脑屏障（BBB）的MPC抑制剂MSDC-0160进行的临床前患者源性原位异种移植（PDOX）试验取得成功，该药物能增强标准化疗联合放疗（TMZRT）方案，有效延缓疾病复发并延长动物存活期。文章的研究结果表明，MPC在标准TMZ-RT治疗后介导GBM的侵袭性和分子进化中起着关键作用，阐明了与治疗相关的代谢脆弱性，从而可能改善GBM患者的生存结果。

CRISPRoff多重表观遗传记忆编辑实现GBM化疗增敏

Multiplexed epigenetic memory editing using CRISPRoff sensitizes glioblastoma to chemotherapy 

Katie Lin and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 6, June 2025, Pages 1443–1457, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf055

编译：王风景 万大海

多形性胶质母细胞瘤（GBM）对替莫唑胺（TMZ）和洛莫司汀（CCNU）等烷化剂普遍耐药，主要瓶颈在于DNA修复酶MGMT启动子区“去甲基化”，使其持续高表达并快速修复药物诱导的DNA损伤。加州大学旧金山分校S. John Liu团队把CRISPRoff这一表观遗传记忆编辑器搬上舞台，仅通过一次短暂递送，就在MGMT启动子CpG岛“贴上”稳定且可遗传的甲基化标签，把基因“音量键”关到几乎静音。

实验首先在LN18、T98G两种GBM细胞系中验证：三组独立sgRNA联合CRISPRoff mRNA电穿孔后5–8天，MGMT mRNA水平降低97%，蛋白几乎清零。单克隆扩增并连续传代243天，MGMT表达抑制率高达99.65%，仅1/8克隆将MGMT表达重新激活到接近基线水平。亚硫酸氢盐测序显示靶向CpG位点甲基化由<5%提高至>80%，而全转录组测序未发现显著脱靶，证明静默MGMT基因操作既深又准。

CRISPRoff抑制MGMT使GBM细胞对TMZ化疗敏感。多克隆细胞在4–5天内对TMZ IC50下降100倍以上；单克隆最大降幅达762倍，且药效维持8个月以上。MGMT cDNA过表达可完全挽救抗药性，证实增敏确由MGMT缺失驱动。为了测试替代的非病毒递送模式是否可以用于诱导基于CRISPRoff的基因沉默和TMZ致化，使用3种不同的脂质纳米颗粒(LNPs)和2种mRNA:sgRNA质量比共同包装靶向MGMT的CRISPRoff mRNA和sgRNA。所有LNP组合都足以诱导MGMT抑制和TMZ致敏。

颅内原位模型进一步验证体内疗效。经CRISPRoff编辑的荧光素酶标记LN18细胞移植至裸鼠脑内，TMZ口服5天后，MGMT沉默组肿瘤完全消退时间显著提前，免疫组化显示MGMT蛋白消失、caspase-3信号增强，且未见明显毒副作用。

研究并未止步于单一靶点。团队利用全基因组CRISPRi筛选，在LN18和T98G中锁定Fanconi贫血通路、HR修复通路等CCNU增敏基因，其中BRIP1、FANCE评分最高。随后以CRISPRoff进行多重表观遗传编辑：单独沉默BRIP1或FANCE已使CCNU IC50下降约2倍；若同时沉默MGMT+BRIP1+FANCE，T98G的IC50从66.97 μM骤降至3.29 μM，增敏幅度6.7倍，且药物存在是产生协同效应的必要条件。

在患者原代GBM培养中，CRISPRoff靶向MGMT导致TMZ增敏。四例MGMT启动子未甲基化的新鲜手术标本在血清-free肿瘤球体系中培养，CRISPRoff电穿孔后MGMT蛋白彻底消失；TMZ处理后细胞增殖阻滞、S期比例锐减、凋亡显著，甚至在传统耐药浓度（100 μM）下仍可见大量细胞死亡。

与Cas9直接切除MGMT的策略相比，CRISPRoff表观沉默避免了DNA双链断裂带来的潜在结构变异，且编辑结果更均一，TMZ增敏效果更稳健。作者指出，CRISPRoff一旦完成甲基化“写入”，无需持续表达元件即可长期维持，利于降低递送剂量和免疫反应；同时，沉默可逆，为后续调整治疗窗口提供安全阀。

综上，该团队用一次“表观遗传速写”，把耐药GBM重新拉回烷化剂的杀伤范围，并搭建“先CRISPRi筛选、再CRISPRoff多重编辑”的通用平台，为攻克胶质母细胞瘤提供了可扩展、可临床转化的精准方案。但本研究仍存在一些局限性，如长期培养出现 1/8 克隆的 MGMT 重新激活，提示表观遗传逃逸风险。早期观察到 IFN/TNFα 通路轻度受抑，存在潜在脱靶或局部异染色质扩散隐忧。LNP 颅内渗透深度、神经毒性及免疫反应尚未在体内全面评估。仅聚焦 MGMT、BRIP1、FANCE，未覆盖 GBM 高度异质性的其他耐药机制（如 TERT）。

图一：CRISPRoff可能特异性抑制GBM细胞中的MGMT。(A) CRISPRoff mRNA和sgRNA通过 电穿孔进入GBM细胞，通过DNMT3A/3L和KRAB结构域导致基因抑制。(B) MGMT基因座 有3个独立的sgrna靶向CpG岛的原间隔位置，以及4个CpG位点与胶质瘤高突变亚型显著相关，并改善了生存率(C)在传递CRISPRoff和指定的sgRNA后的指定天数，在多克隆和单克隆LN18细胞中，规范化为RPLP0管家基因的MGMT mRNA的RT-qPCR。引物集K和O分别代表来自(Kreth et al. 2011)和Origene的2对独立的qPCR引物。(D)将所有3种sgrna一起递送的LN18细胞中MGMT mRNA的RT-qPCR(见(C))。(E)传递CRISPRoff和指示sgRNA后，多克隆和单克隆T98G细胞中MGMT mRNA的RT-qPCR。(F)在递送CRISPRoff和指定的sgRNA后指定的时间内，对多克隆和单克隆LN18细胞中的MGMT蛋白进行Western blot检测。(G)用3种sgrna一起递送的LN18细胞对MGMT蛋白进行Western blot，如(F)所示。(H)对T98G细胞的MGMT蛋白进行Western blot，见(F)。(I)靶向亚硫酸盐测序MGMT启动子，在传递CRISPRoff和指示的sgRNA后评估LN18单克隆细胞中的17个CpG位点。(J)在中期(40 - 64d)和后期(134-209d)时间点比较CRISPRoff在2个独立sgrna (sgMGMT-1B， - 3b)上靶向MGMT启动子的RNA-seq火山图。

图二：通过全基因组CRISPRi筛选鉴定的CCNU致敏剂的多重靶向。(A)稳定表达dCas9-Zim3的GBM细胞全基因组CRISPRi筛选示意图。双sgRNA文库通过慢病毒转导。在LN18细胞和T98G细胞中，在载药或CCNU存在的情况下进行平行筛选。利用整合sgRNA条形码的靶向测序来定量CRISPRi抑制靶基因的表型。(B) LN18(左)和T98G(右)中来自全基因组CRISPRi筛选的所有基因靶点的瀑布图，在每个筛选端点对CCNU条件下的sgRNA条形码与载药条件下的log2比率进行排序。表型是3个重复屏幕的平均值。浅灰色=非靶向sgRNA。深灰色=靶向sgRNA的基因。(C) CCNU筛选的基因集富集分析，负富集项排名靠前。(D)在多克隆LN18细胞中，传递CRISPRoff mRNA和sgRNAs的指示组合后，归一化为RPLP0管家基因的BRIP1或MGMT mRNA的RT-qPCR。(E)与(D)相同，但为T98G。(F)传递CRISPRoff和指定的sgrna组合后，LN18(左)和T98G (G)多克隆群体中CCNU敏感性的细胞活力剂量反应曲线。对每种情况计算IC50。

EGFR和EGFRvIII利用宿主防御通路促进胶质母细胞瘤的进展

EGFR and EGFRvIII coopt host defense pathways promoting progression in glioblastoma

Zhenyi An and others

Neuro Oncol. 2025 Feb 10;27(2): 383–397,doi:10.1093/neuonc/noae182

编译：程传东 陈一楠

表皮生长因子受体（EGFR）及其突变体 EGFRvIII 的共同扩增是胶质母细胞瘤（GBM）的特征性遗传改变之一。本研究利用磷酸化蛋白质组学、RNA测序、TCGA 数据分析、细胞实验及小鼠模型，系统探讨了EGFR/EGFRvIII介导的信号传导机制。研究发现EGFR/EGFRvIII可激活Toll样受体2（TLR2）信号，且TLR2敲除显著改善小鼠存活率（p<0.001）。磷酸化蛋白组学分析表明，TLR2在T760和Y761处的磷酸化促进其活性，进而增强肿瘤进展，其中ROCK2是 EGFR/EGFRvIII介导的TLR2 T760磷酸化的上游激酶，ROCK2抑制剂 RKI1447可阻断该信号轴并减少肿瘤细胞增殖和浸润。此外，EGFR/EGFRvIII通过ROCK2激活WNT/β-catenin信号通路，增强CCL2及相关趋化因子的表达，从而促进巨噬细胞浸润，形成免疫逃逸环境。体内实验表明，TLR2的敲除不仅减少了巨噬细胞浸润，还抑制了肿瘤的自我维持和恶性进展。本研究揭示了EGFR/EGFRvIII通过ROCK2介导的TLR2和WNT/β-catenin信号轴促进GBM进展的新机制，并表明TLR2可作为潜在的治疗靶点。ROCK2和TLR2的抑制可能为GBM治疗提供新的策略，尤其是在EGFR/EGFRvIII共扩增的患者中。因此，EGFR和EGFRvIII通过ROCK2介导的TLR2及WNT信号通路共同促进GBM进展，TLR2敲除或ROCK2抑制均可改善小鼠生存，提示针对这些通路的治疗策略可能有助于GBM患者的临床管理。

全基因组CRISPR-Cas9筛选鉴定出BCL家族成员作为实验性胶质瘤中对瑞戈非尼反应的调节因子

Genome-wide CRISPR-Cas9 screens identify BCL family members as modulators of response to regorafenib in experimental glioma 

Lara Annina Haeusser and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 4, April 2025, Pages 916–931, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae278

编译：王樑

背景：已获批用于胶质母细胞瘤患者的全身性治疗方案有限。II期REGOMA试验提示，多酪氨酸激酶抑制剂瑞戈非尼可改善进展期胶质母细胞瘤患者的中位总生存期，但这一结果尚未得到GBM AGILE试验的证实。目前，瑞戈非尼已被用于新诊断胶质母细胞瘤的单药治疗或联合标准治疗。包含瑞戈非尼的合理联合治疗方案可能是一种可行策略。本研究旨在鉴定基于功能研究的包含瑞戈非尼的联合治疗方案。

方法：我们采用全基因组CRISPR-Cas9功能基因组学靶点发现方法，通过激活和敲除筛选，结合遗传学、药理学和功能学验证开展研究。通过RNA测序和DigiWest技术评估瑞戈非尼诱导的分子改变。我们在三种原位胶质瘤小鼠模型（同源SMA560/VM/Dk模型和两种异种移植模型）中对选定的基于功能研究的联合治疗方案进行了体内研究，并对治疗后脑组织进行了免疫组织化学检测。

结果：我们鉴定出瑞戈非尼反应的潜在调节因子，包括BCL2、BCL2L1、ITGB3、FOXC1、SERAC1、ARAF和PLCE1。在体外、离体和体内实验中，瑞戈非尼联合Bcl-2/Bcl-xL抑制的效果均优于两种单药治疗。我们发现瑞戈非尼诱导的Bcl-2下游靶点趋化因子受体1（CCR1）调控可能是其潜在的分子机制之一。此外，瑞戈非尼可导致胶质瘤相关微环境中髓系细胞亚群的变化。

结论：本临床前研究采用基于功能基因组学的靶点发现方法，并针对瑞戈非尼进行了后续验证，为临床转化提供了生物学依据。特别是，有必要在临床试验中探索瑞戈非尼联合navitoclax的疗效。

G-四链体稳定剂CX-5461与放疗有效联合，靶向α地中海贫血/智力障碍X连锁缺陷型恶性胶质瘤

G-quadruplex stabilizer CX-5461 effectively combines with radiotherapy to target α-thalassemia/mental retardation X-linked-deficient malignant glioma

Sharvari Dharmaiah and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 4, April 2025, Pages 932–947, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae248

编译：王樑

背景：α地中海贫血/智力障碍X连锁基因（ATRX）失活是大部分恶性胶质瘤的关键分子特征。ATRX缺陷会导致异常的G-四链体（G4）DNA二级结构形成，加剧复制应激与基因组不稳定性。基于早期研究，我们评估了药物性G4稳定化在多大程度上能选择性增强ATRX缺陷型胶质瘤临床前模型中的DNA损伤与细胞死亡。

方法：我们使用G4稳定剂CX-5461，分别对患者来源的胶质瘤干细胞（GSCs）进行体外处理，并对GSC侧腹及颅内小鼠异种移植瘤进行体内处理，以评估其单药疗效及与电离辐射（IR，当前治疗标准的核心手段）联合的效果。

结果：相较于ATRX完整型对照，CX-5461对ATRX缺陷型GSCs表现出剂量依赖性杀伤。机制研究表明，在ATRX缺陷型GSCs中，CX-5461对组蛋白变体H3.3的沉积破坏、复制应激与DNA损伤的增强、p53非依赖性凋亡的激活以及G2/M期阻滞的诱导程度均显著强于ATRX完整型细胞。体内实验进一步验证了这些发现：CX-5461联合IR治疗可显著延缓ATRX缺陷型侧腹异种移植瘤的生长，并延长荷瘤小鼠生存期。组织病理学分析显示，无论单独使用还是联合IR，经CX-5461处理的肿瘤均表现出增殖减少、凋亡增加，且G4形成、复制应激与DNA损伤水平显著升高。此外，尽管CX-5461的血脑屏障穿透能力有限，但其系统性给药仍能在ATRX缺陷型颅内GSC模型中诱导可检测的药效学效应。

结论：综上，本研究充分证实了G4稳定化作为靶向ATRX缺陷型恶性胶质瘤新型治疗策略的有效性，并阐明了其作用机制，为该策略的临床转化奠定了基础。

塞利尼索在胶质母细胞瘤（GBM）中的作用机制及联合

Autophagy modulates glioblastoma cell sensitivity to Selinexor-mediated XPO1 inhibition 

Yongjian Tang and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 5, May 2025, Pages 1210–1226, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae280

编译：刘仲涛

治疗策略

胶质母细胞瘤（GBM）是最常见且致命的原发性颅内肿瘤，对传统化疗具有高度抵抗性，尤其是对凋亡诱导剂不敏感。塞利尼索通过抑制XPO1（一种关键核输出蛋白）来阻止肿瘤抑制蛋白和其他重要分子的核输出，从而诱导肿瘤细胞死亡。然而，GBM细胞对塞利尼索的敏感性及其作用机制尚不完全清楚。

通过实验得出，塞利尼索具有诱导自噬的作用：所有测试的GBM细胞系在塞利尼索处理后均表现出剂量和时间依赖性的细胞活力下降，但主要反应是自噬而非凋亡。塞利尼索诱导的自噬是其抑制XPO1的直接结果，因为其他XPO1抑制剂也产生类似效果，且XPO1 C528S突变体细胞对塞利尼索不敏感。自噬的保护作用：抑制自噬（通过CQ或siRNA介导的ATG7抑制）显著增强了塞利尼索诱导的细胞死亡，表明自噬在GBM细胞中起保护作用。塞利尼索诱导的自噬部分归因于转录因子TFEB的核滞留，TFEB是自噬和溶酶体生物发生的关键调节因子。

本研究首次揭示了塞利尼索在GBM细胞中主要通过诱导自噬而非凋亡来发挥作用，且这种自噬反应是细胞的一种保护机制。

通过抑制自噬，可以显著增强塞利尼索诱导的细胞死亡，这为GBM治疗提供了新的策略。特别是，塞利尼索与CQ的联合使用在体外和体内实验中均表现出显著的抗肿瘤效果，且CQ作为一种低毒性、已广泛应用于临床的药物，使得这一联合治疗方案具有较高的可行性和应用前景。

基于本研究的结果，建议未来在GBM患者中开展塞利尼索与CQ联合治疗的临床试验，以验证其在人体中的疗效和安全性。

同时，进一步探索其他自噬抑制剂与塞利尼索的联合使用效果，以及针对不同分子亚型的GBM患者制定个性化治疗方案，将是未来研究的重要方向。

总之，本研究为GBM治疗提供了新的视角和策略，强调了自噬在肿瘤细胞耐药性中的重要作用，并提出了通过抑制自噬来增强现有药物疗效的潜在方法。

IGF-Trap在胶质母细胞瘤治疗中的潜力及其纳米颗粒递送系统的优化

Nanoparticle encapsulation enables systemic IGF-Trap delivery to inhibit intracerebral glioma growth 

Yinhsuan Michely Chen and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 5, May 2025, Pages 1227–1240, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf011

编译：刘仲涛

胶质母细胞瘤（GBM）是最常见且致命的原发性颅内肿瘤，其治疗面临诸多挑战，包括血脑屏障（BBB）限制药物进入脑部。而IGF-1R（胰岛素样生长因子1受体）在GBM中过度表达，并与肿瘤生长、抗凋亡和细胞周期进程密切相关。IGF-Trap作为一种融合蛋白，通过高亲和力结合IGF-1和IGF-2，阻断其与IGF-1R的结合，从而抑制肿瘤生长。然而，如何有效递送IGF-Trap至脑部仍是待解决的问题。

此篇文章进一步评估了IGF-Trap对GBM细胞生长的影响。优化IGF-Trap的脑部递送系统，提高其生物利用度。探讨IGF-Trap纳米颗粒在GBM治疗中的疗效。关键发现了IGF-Trap抑制GBM细胞生长：IGF-Trap在体外显著抑制了U87 MG和GL261细胞的增殖，并阻断了IGF-1诱导的细胞周期进程。

在皮下GBM模型中，IGF-Trap显著抑制了肿瘤生长，并延长了小鼠的生存期。

纳米颗粒封装提高脑部递送效率：TRIOZAN™纳米颗粒封装显著提高了IGF-Trap在脑部的摄取和滞留，通过光学成像和免疫组化验证了其在脑部的分布。NP-Trap在脑部的荧光信号强度显著高于游离IGF-Trap，且在血管周围区域检测到更高的药物浓度。NP-Trap在颅内GBM模型中的疗效：在颅内GBM模型中，NP-Trap显著抑制了肿瘤生长，并延长了小鼠的生存期，而游离IGF-Trap的效果不显著。联合治疗（先给予NP-Trap再接种肿瘤细胞）进一步提高了治疗效果，表明NP-Trap在预防肿瘤复发方面具有潜力。

本研究首次证明了IGF-Trap在GBM治疗中的有效性，并通过纳米颗粒技术优化了其脑部递送。纳米颗粒封装显著提高了IGF-Trap在脑部的生物利用度，从而增强了其抗肿瘤效果。这一发现为GBM治疗提供了新的策略，特别是针对那些对传统治疗不敏感的患者。

基于本研究的结果，建议未来在GBM患者中开展IGF-Trap纳米颗粒的临床试验，以验证其在人体中的疗效和安全性。同时，进一步探索其他纳米材料或递送系统，以及联合其他治疗手段（如放疗、化疗或免疫治疗），可能会进一步提高GBM的治疗效果。此外，纳米颗粒技术在其他脑部肿瘤和转移瘤治疗中的应用也值得深入研究。

靶向PGE2介导的衰老神经元改善肿瘤治疗

Targeting PGE2 mediated senescent neuron improves tumor therapy 

Jianyi Zhao and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 6, June 2025, Pages 1491–1506, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf065

编译：郜彩斌 康福

最近的研究强调了肿瘤与神经元之间的双向信号传递；然而，肿瘤与神经元在响应放化疗时的相互作用仍然不清楚，这阻碍了肿瘤的治疗。本研究采用胶质母细胞瘤类器官（GBOs）与原代神经元共培养模型，结合靶向代谢组学、RNA下拉实验、质谱分析、免疫共沉淀、RNA测序、转录/蛋白验证及多电极阵列技术，系统解析神经元-肿瘤相互作用对治疗的响应机制。通过小鼠原位模型进行体内验证，并基于血清检测、组织微阵列分析及TCGA数据库评估其诊断与预后价值。结果：GBOS在放化疗中招募和诱导有利于肿瘤存活的衰老神经元。靶向代谢组学显示，肿瘤源性前列腺素E2(PGE2)诱导的神经元衰老表型显著增加。前列腺素E合成酶3(PTGES3)是PGE2合成的关键酶。生化研究表明，放疗或化疗药物触发的天冬酰胺内肽酶(AEP)特异性地切割eIF4A1产生teIF4A1-C，teIF4A1-C从DDX6中分离出来，并招募eIF4A3和PABPN1来促进PTGES3的mRNA稳定性。PGE2升高可促进AEP的表达。抑制PGE2或AEP可减少神经元衰老和延缓肿瘤进展。值得注意的是，单细胞分析进一步表明，AEP/PTGES3/EIF4A1在肿瘤细胞中的表达与高神经元连接性胶质母细胞瘤中衰老的神经元CDKN1A一致。放疗后血清PGE2浓度升高，耐药组PGE2浓度升高。PTGES3高表达与预后不良相关。本文作者的研究揭示了AEP/PGE2反馈环调节放化疗后肿瘤诱导的神经元衰老，并强调了其对改善肿瘤治疗的治疗价值。

胶质母细胞瘤临床应答研究进展：评估SHP1705 CRY2激活剂在临床前模型中的疗效及I期试验中的安全性

Advancing clinical response against glioblastoma: Evaluating SHP1705 CRY2 activator efficacy in preclinical models and safety in phase I trials 

Priscilla Chan and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 7, July 2025, Pages 1772–1786, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf089

编译：刘仲涛

背景：已有研究表明，生物钟组件脑和肌肉组织芳香烃受体核转位蛋白样1（BMAL1）与生物钟输出周期蛋白（CLOCK），对胶质母细胞瘤（GBM）干细胞（GSC）的生物学特性及存活至关重要。基于此，我们研发了一种新型隐花色素（CRY）激活剂SHP1705，该激活剂可抑制BMAL1-CLOCK的转录活性。

方法：我们借助GlioVis数据库，筛选出在非肿瘤组织与GBM组织中差异表达的生物钟基因。通过体外与体内实验，将SHP1705与早期CRY激活剂骨架化合物的疗效进行对比，验证其对患者来源GSC及异种移植瘤的作用效果。同时，我们采用新型REV-ERB激动剂SR29065（该药物可抑制BMAL1转录），探究针对生物钟转录-翻译反馈环路（TTFL）两个负向调控分支进行靶向干预，是否能对各类GBM细胞产生协同抑制作用。

结果：SHP1705是首个在I期临床试验中被证实安全且耐受性良好的生物钟调节化合物。与已报道的CRY激活剂相比，SHP1705对CRY2亚型的选择性更高，且抑制GSC活性的效力更强，这使其在CRY2表达水平较低的GBM治疗中展现出良好应用前景。对于携带GSC构建的GBM肿瘤小鼠，SHP1705可延长其存活时间。当SHP1705与新型REV-ERB激动剂SR29065联合使用时，对多种GSC细胞系及分化型GSC（DGC）均表现出协同抑制效果。

结论：本研究证实了SHP1705对GSC的抑制疗效，而GSC正是导致GBM患者放化疗耐药、预后不佳的主要原因。新型生物钟调节化合物无论是作为单药，还是与其他化合物或当前标准治疗方案联合使用，在GBM靶向治疗中均具有极高潜力。

Toll样受体激动剂促进三级淋巴结构的形成并改善抗胶质瘤免疫

Toll-like receptor agonists promote the formation of tertiary lymphoid structure and improve anti-glioma immunity

Shaoping Shen and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 1, January 2025, Pages 140–154, doi: 10.1093/neuonc/noae167

编译：郭少春

胶质瘤的特点是有限的淋巴细胞浸润，属于一种 “免疫荒漠” 性肿瘤，对多种免疫疗法不敏感。本研究旨在探索能够在胶质瘤免疫微环境（GME）中诱导三级淋巴结构（TLS）形成的治疗策略，从而将其从免疫抵抗状态转变为免疫激活状态。研究通过颅内给予Toll样受体（TLR）激动剂（OK-432，一种TLR2/4/9激动剂）和胶质瘤抗原（颅内注射αTLR混合物），成功诱导了胶质瘤微环境中三级淋巴结构的形成。采用染色分析、抗体中和、单细胞RNA测序（scRNA-Seq）以及B细胞受体（BCR）/T细胞受体（TCR）测序等方法，来研究三级淋巴结构形成的潜在机制及其在抗胶质瘤免疫中的作用。此外，还开展了一项初步的转化临床研究。结果发现，三级淋巴结构的形成与胶质瘤微环境中淋巴细胞浸润的增加相关，并且可改善荷瘤小鼠的预后。在对三级淋巴结构诱导机制的研究中，某些巨噬细胞/小胶质细胞和辅助性T细胞17（Th17）分别表现出“淋巴组织诱导相关样细胞（LTo）”和“淋巴组织诱导细胞（LTi）”的标志物特征，通过淋巴毒素α/β（LTα/β）-淋巴毒素β受体（LTβR）的相互作用促进了三级淋巴结构的诱导形成。在三级淋巴结构形成后，CD4+和CD8+T细胞（而非CD19+B细胞）对抗胶质瘤免疫起到了作用。对脑部和淋巴结中的B/T细胞进行比较分析发现，脑部的B/T细胞呈现出从初始状态向成熟状态的转变，一些B细胞显示出与类别转换重组（CSR）相关基因的富集现象，同时观察到了V基因的使用情况以及克隆型偏倚。在相关的临床研究中，颅内注射αTLR混合物治疗具有耐受性，趋化因子/细胞因子检测为胶质瘤微环境中三级淋巴结构的形成提供了初步证据支持。结论：在胶质瘤微环境中诱导三级淋巴结构的形成可增强抗胶质瘤免疫，改善免疫微环境，并控制胶质瘤的生长，这为未来治疗胶质瘤提供了潜在的治疗途径。

靶向胶质母细胞瘤起始细胞的新型治疗策略：EVA1抗体药物偶联物的开发与机制解析

EVA1-antibody drug conjugate is a new therapeutic strategy for eliminating glioblastoma-initiating cells

Jiahui Hou and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 3, March 2025, Pages 682–694, https://doi.org/10.1093/neuonc/noae226

编译：闫子涵 苏凯博 杨建凯

胶质母细胞瘤（Glioblastoma, GBM）的治疗抵抗与复发主要归因于肿瘤起始细胞（Glioma-initiating cells, GICs）的持续存活与自我更新能力。针对这一临床难题，日本理化学研究所Hou Jun团队在《Neuro-Oncology》（2025;27:682-694）中报道了一种靶向细胞表面蛋白EVA1（Epithelial V-like antigen 1）的抗体药物偶联物（Antibody-drug conjugate, ADC），通过精准杀伤GICs并破坏肿瘤干细胞生态位，显著抑制GBM复发与侵袭性进展，为突破现有治疗瓶颈提供了创新性方案。

研究团队首先通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析GBM患者样本（n=45），发现EVA1在GICs亚群中特异性高表达（较分化肿瘤细胞高8.3倍，P<0.001），且与患者总生存期显著负相关（HR=3.12, 95%CI 2.05-4.75）。基于此，研究者开发了EVA1靶向ADC（EVA1-MMAE），其由人源化IgG1抗体通过可裂解连接子（maleimidocaproyl-valine-citrulline-p-aminobenzyloxycarbonyl）偶联微管抑制剂MMAE（单甲基澳瑞他汀E）。体外实验显示，该ADC对原代GICs的半数抑制浓度（IC50）为0.38 nM，较传统替莫唑胺（TMZ）降低两个数量级（TMZ IC50=42.5 μM），且对正常神经干细胞毒性可控（选择性指数SI=135）。

机制研究表明，EVA1-MMAE通过抗原介导的内吞作用进入GICs后，在溶酶体组织蛋白酶B作用下释放MMAE，导致微管网络崩解（免疫荧光显示α-tubulin聚合减少78%）并诱导G2/M期阻滞（流式细胞术显示阻滞比例达63%）。同时，ADC治疗显著下调GICs干性维持关键因子SOX2（蛋白水平降低82%）与OCT4（降低75%），并抑制Wnt/β-catenin通路活性（TOPFlash报告基因活性下降91%）。值得注意的是，EVA1-MMAE可穿透血脑屏障（在小鼠模型中脑组织/血浆浓度比达0.65），在PDX模型中单次给药（3 mg/kg）可使肿瘤体积缩小67%（MRI评估，P<0.001），并延长荷瘤小鼠中位生存期至58天（对照组28天，Log-rank P=0.002）。

研究进一步解析了EVA1的生物学功能：CRISPR-Cas9敲除EVA1导致GICs球体形成能力下降54%（P=0.003），且其通过调控整合素α6β4-FAK信号轴维持肿瘤细胞与血管周围生态位的相互作用。空间转录组分析发现，EVA1+ GICs富集于肿瘤-正常组织交界区，其分泌的TGF-β1通过旁分泌作用激活周细胞中的SMAD2/3通路，形成免疫抑制微环境（CD8+ T细胞浸润减少2.8倍）。而EVA1-MMAE治疗可打破这一恶性循环，使肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）向M1表型极化（CD86+比例从15%升至49%），并增强PD-1抑制剂疗效（联合治疗组完全缓解率达33%）。

临床转化方面，研究者优化了ADC的药代动力学特性：通过Fc区点突变（L234A/L235A）消除抗体依赖的细胞吞噬（ADCP）效应，将血液半衰期延长至216小时（野生型抗体为72小时）。在GLP毒理实验中，EVA1-MMAE未表现出显著肝毒性（ALT/AST水平与对照组无差异）或骨髓抑制（中性粒细胞计数维持在1.5×10^9/L以上）。基于此，首项Ⅰ期临床试验（NCT05543219）已启动，旨在评估该药物在复发GBM患者中的安全性与初步疗效。

该研究的创新性体现在三方面：①首次揭示EVA1作为GICs特异性表面标志物的功能，突破传统靶点（如CD133）的异质性限制；②通过理性设计优化ADC连接子稳定性与毒素释放效率，克服血脑屏障递送障碍；③阐明靶向GICs生态位重塑免疫微环境的协同机制。未来研究需进一步探索EVA1在GBM分子亚型（如IDH野生型与突变型）中的表达差异，并开发伴随诊断标志物以实现精准治疗。此项工作为胶质母细胞瘤的根治性治疗提供了全新范式，标志着ADC疗法在神经肿瘤领域的重大突破。

本研究表明，颅内注射单甲基奥瑞他汀E（MMAE）偶联的抗EVA1抗体B2E5（B2E5-抗体药物偶联物，B2E5-ADC）可通过诱导胶质母细胞瘤起始细胞（GlCs）死亡，从而抑制脑内胶质母细胞瘤起始细胞的致瘤作用。此外，由于小胶质细胞和巨噬细胞的浸润，该注射还会导致含铁血黄素沉积。这些研究结果凸显了B2E5作为一种针对胶质母细胞瘤（GBM）的新型治疗策略的潜力。

肠道拟杆菌通过调节CD8+T细胞肿瘤浸润来促进胶质瘤进展

Intestinal Bacteroides drives glioma progression by regulating CD8+ T cell tumor infiltration

Jit Chatterjee and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 6, June 2025, Pages 1579–1593, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf024

编译：刘竞辉

背景：肠道微生物群调节正常的大脑生理机能以及多种神经疾病的发病机制。尽管先前的研究表明这是通过免疫细胞实现的，但其潜在机制仍不清楚。利用两种特征明确的神经纤维瘤病1型（NF1）癌症易感综合征背景下发生的低级别胶质瘤的小鼠模型，我们试图确定肠道微生物组对视神经胶质瘤进展的影响。

方法：将3月龄的视神经胶质瘤的1型神经纤维瘤病（Nf1）基因突变小鼠（Nf1OPG 小鼠）置于无菌（GF）环境中饲养，或用特定的抗生素混合物进行处理，或接受粪便微生物群移植（FMT）。通过16S基因分型鉴定肠道微生物种类。全身性给予中和转化生长因子-β（TGFβ）抗体，而体外实验则使用分离的小鼠小胶质细胞和T细胞。采用既定方法进行单细胞RNA测序分析。

结果：在无菌环境中饲养或出生后用万古霉素处理的Nf1 OPG小鼠未出现视神经胶质瘤，也未表现出OPG引起的视网膜神经纤维层变薄，而常规饲养小鼠的粪菌移植或定植拟杆菌属菌种则可逆转这一现象。此外，肠道微生物群对胶质瘤发生的调节作用是通过循环中的转化生长因子β（TGFβ）介导的，全身性中和TGFβ可抑制Nf1-OPG的生长。TGFβ被证明作用于肿瘤相关单核细胞诱导 Ccl3表达，并招募CD8+T细胞，这是胶质瘤生长所必需的。

结论：综合来看，这些发现首次确立了肠道微生物群中的拟杆菌与NF1-LGG病理生物学之间的机制性关联，这既为未来的风险评估策略提供了依据，也为治疗提供了机会。

治疗诱导衰老的胶质母细胞瘤细胞通过激活DDX58介导的STAT1信号通路维持促癌免疫微环境

Therapy-induced senescent glioblastoma cells sustain a procancer immune microenvironment by activating DDX58-mediated STAT1 signaling 

Zhixing Wang and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 9, September 2025, Pages 2265–2280, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf107

编译：郜彩斌 康福

在不同的情境下，治疗诱导的癌细胞衰老可促进或抑制肿瘤的进展和复发，但其潜在机制和对肿瘤免疫微环境的影响尚不清楚。 本研究通过药物处理在体外建立了衰老型胶质母细胞瘤细胞模型。通过在C57BL/6J雄性小鼠体内共注射化疗诱导的衰老细胞与致瘤性GL261细胞，证实了衰老细胞具有促肿瘤作用。此外，我们采用条件培养基共培养实验，在体外探究了胶质母细胞瘤衰老细胞的功能。在机制层面，借助基于CRISPR-Cas9的筛选技术，我们发现RNA结合蛋白DDX58在胶质母细胞瘤衰老细胞中被诱导表达。通过联合RNA测序与蛋白质质谱分析技术，我们观察到STAT1信号通路被激活。后续我们进一步开展免疫沉淀实验，明确了 DDX58与STAT1之间的相互作用关系。我们的研究表明，胶质母细胞瘤细胞在化疗后可进入衰老状态。在体内实验中，衰老的胶质母细胞瘤细胞具有促肿瘤作用，并会降低雄性小鼠的生存率。在机制层面，我们发现RNA结合蛋白DDX58在治疗诱导的胶质母细胞瘤细胞衰老过程中发挥重要作用。抑制DDX58的表达可减缓治疗诱导的细胞衰老进程。DDX58的激活依赖于BAX蛋白介导的线粒体双链RNA（mtdsRNA）在细胞质中的累积。此外，DDX58可通过激活STAT1介导的集落刺激因子1（CSF1）转录，促进肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的募集及其向M2型的极化。我们还发现，DDX58可通过抑制泛素化E3连接酶TRIM21介导的STAT1泛素化修饰，在翻译后水平对STAT1进行调控。与单独使用替莫唑胺（TMZ）治疗相比，采用能够阻断STAT1信号通路的氟达拉滨与TMZ联合治疗，可在体内更有效地减少肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的募集，并延缓肿瘤生长。此外，在体内实验中敲低STAT1的表达，能够增强TMZ的治疗效果，并延长荷瘤雄性小鼠的生存期。由治疗诱导的胶质母细胞瘤衰老细胞所介导的促肿瘤免疫微环境形成，其关键机制为DDX58-STAT1-CSF1信号轴，该信号轴或可成为改善传统治疗诱导的胶质母细胞瘤细胞衰老的潜在治疗靶点。

一种多模态胶质瘤免疫治疗策略：联合TLR9靶向STAT3反义寡脱氧核苷酸与PD1检查点阻断

Multimodal glioma immunotherapy combining TLR9-targeted STAT3 antisense oligodeoxynucleotides with PD1 immune checkpoint blockade 

Chia-Yang Hung and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 9, September 2025, Pages 2296–2312, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf099

编译：杨建凯 张志峰

胶质母细胞瘤（GBM）作为最具侵袭性的原发性脑肿瘤，其免疫抑制性微环境是导致当前免疫治疗（如PD-1/PD-L1抑制剂）疗效有限的核心瓶颈。针对这一挑战，一项发表于《Neuro-Oncology》（2025;27:2296-2312）的研究提出并验证了一种创新性的多模态免疫治疗策略。该策略创新性地将靶向递送至肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的STAT3反义寡脱氧核苷酸（ASO）与全身性PD-1免疫检查点阻断相结合，旨在从多维度重塑肿瘤免疫微环境，从而协同激活强大的抗肿瘤免疫反应。

研究的理论基础在于同时干预肿瘤免疫微环境中两个关键的抑制性节点。其一，信号转导与转录激活因子3（STAT3）在GBM细胞和髓系来源的抑制性细胞（特别是TAMs）中持续激活，是驱动免疫抑制、肿瘤增殖和治疗抵抗的核心通路。其二，肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）上高表达的PD-1分子导致其功能耗竭，即使解除髓系细胞的抑制，效应免疫细胞仍可能无法有效攻击肿瘤。传统单一的STAT3小分子抑制剂面临血脑屏障穿透性差和全身毒性大等问题。本研究的关键创新在于设计了一种CpG基序修饰的TLR9靶向STAT3 ASO（简称CpG-STAT3 ASO）。该设计巧妙利用了GBM微环境中TAMs高表达Toll样受体9（TLR9）的特性，使得ASO能够被TAMs特异性摄取。一旦进入细胞，ASO通过碱基配对原则与STAT3 mRNA结合，诱导其降解，从而在肿瘤局部精准、高效地敲低STAT3表达，避免了全身给药的脱靶效应。

在临床前GL261和CT-2A原位胶质瘤小鼠模型中，该多模态疗法展现了显著的协同抗肿瘤效果。单用PD-1抑制剂仅能略微延长小鼠生存期，而单用CpG-STAT3 ASO虽能有效重编程TAMs，使其从促瘤的M2表型向抗瘤的M1表型极化（表现为CD86、iNOS表达上调，Arg-1表达下调），但仍不足以完全控制肿瘤生长。然而，两者联合治疗产生了“1+1>2”的效应：CpG-STAT3 ASO首先解除了髓系细胞介导的免疫抑制，增加了细胞毒性CD8+ T细胞的肿瘤浸润；随后，PD-1阻断则有效逆转了这些T细胞的功能耗竭状态（表现为TIM-3、LAG-3等共抑制分子表达下降，IFN-γ、TNF-α分泌增加）。这种序贯式的免疫激活最终导致了强大的抗肿瘤免疫力，显著抑制了肿瘤生长并大幅延长了荷瘤小鼠的生存期。进一步的免疫谱分析证实，联合治疗组肿瘤微环境中呈现“热肿瘤”特征，不仅M1型TAMs和活化的CD8+ T细胞比例显著增加，还诱导了免疫记忆的形成，为长期控制肿瘤复发提供了可能。

该研究的转化医学意义深远。它首次在体内证实了通过TLR9靶向递送技术实现肿瘤局部STAT3特异性沉默的可行性，为克服中枢神经系统药物递送难题提供了新思路。更重要的是，它构建了一个清晰的治疗逻辑：即先通过靶向髓系细胞“解除刹车”，再通过检查点阻断“踩下油门”，从而实现对抗肿瘤免疫反应的全面启动。这种多模态、分步式的免疫治疗策略，为突破胶质母细胞瘤等“冷肿瘤”的免疫治疗困境提供了一个极具前景的新范式。未来，该策略有望与手术、放疗等标准治疗相结合，并可能扩展到其他富含TAMs的实体瘤中，其临床转化前景值得期待。目前，基于该技术的早期临床研究已在筹备中，旨在评估其在复发胶质母细胞瘤患者中的安全性与初步疗效。

图2. 靶向胶质瘤细胞与肿瘤相关髓系细胞的CpG-STAT3反义寡核苷酸设计

胶质母细胞瘤高丰度鞘糖脂对人类iNKT细胞功能的调控作用

Glioblastoma-enriched glycosphingolipids modulate the function of human iNKT cells

Morgan J Coombs and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 10, October 2025, Pages 2592–2604, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf135

编译：王风景 万大海

胶质母细胞瘤（GBM）是恶性程度极高的原发性脑肿瘤，患者预后极差，免疫治疗至今未取得突破性进展。恒定自然杀伤T细胞（iNKT）作为识别脂质抗原的非常规T细胞，可调控肿瘤免疫，但GBM异常脂质代谢与iNKT细胞功能的关联尚未明确。

基于大脑的脂质富集特性以及GBM细胞独特的代谢活性，研究人员提出假设，即GBM富集的脂质可能调控iNKT细胞功能，进而参与肿瘤免疫抑制微环境的形成。在这项研究中，我们旨在阐明GBM干细胞（GSC）富集的脂质对人iNKT 细胞功能的调控作用，揭示GBM免疫抑制的新机制，并寻找潜在治疗靶点。

研究采用液相色谱-质谱（LC/MS）分析GSC、低级别胶质瘤细胞及正常星形胶质细胞的脂质谱，筛选GSC特异性富集的脂质；通过构建CD1d表达的GSC细胞系，结合iNKT细胞系与健康人、GBM患者外周血单个核细胞（PBMC）开展iNKT细胞激活实验；利用CD1d四聚体染色、细胞因子检测、流式细胞术评估脂质抗原对iNKT细胞的激活效果；通过基因编辑（CRISPR/Cas9）调控硫酸鞘脂合成通路关键酶（GAL3ST1、ARSA）的表达，并采用茶碱抑制GAL3ST1活性，探究脂质合成通路对iNKT细胞功能的影响。

实验结果显示，IDH野生型GSC（L0、L1株）特异性富集多种硫酸鞘脂（如 sulf-C24:1、sulf-C24:0）及其前体物质β-半乳糖神经酰胺，其中溶血硫酸鞘脂为GSC特有富集脂质。GSC富集的硫酸鞘脂可通过CD1d分子呈递给iNKT细胞，诱导iNKT细胞表达活化标志物CD69，但无法激发具有抗肿瘤作用的Th1型细胞因子分泌；而溶血硫酸鞘脂可显著抑制iNKT细胞活化，降低CD69表达水平，还能拮抗强效iNKT激动剂α-半乳糖神经酰胺的作用，减少多种细胞因子产生。调控硫酸鞘脂合成通路后，GSC激活iNKT细胞的能力发生改变，过表达GAL3ST1可增强iNKT细胞活化，敲低该基因或用茶碱抑制其活性则会降低iNKT细胞激活水平。

综上所述，该研究首次揭示了GSC富集糖鞘脂对人iNKT细胞的双向调控作用，阐明了溶血硫酸鞘脂的免疫拮抗机制，证实脂质代谢与iNKT细胞介导的抗肿瘤免疫存在直接关联，为GBM免疫治疗提供了全新靶点方向。研究发现的茶碱可靶向硫酸鞘脂合成通路，且能穿越血脑屏障、已用于临床，具备药物重定位的潜力。不过该研究也存在一定局限性，仅聚焦两种IDH野生型GSC株，未覆盖更多GSC亚型，结论的普适性受限，且未深入探究硫酸鞘脂调控iNKT细胞功能的下游分子机制，缺乏动物实验验证靶向硫酸鞘脂通路的体内治疗效果。未来可扩大GSC细胞株的研究范围，结合单细胞测序技术解析相关分子机制，开展动物模型实验验证茶碱联合α-半乳糖神经酰胺的协同治疗效果，推动该策略向临床转化。

双重阻断αVβ8整合素与PD-1克服TGFβ介导的B细胞抑制增强抗胶质瘤免疫

Dual aVß8 Integrin and PD-1 Blockade Overcomes TGFβ-Mediated B-Cell Suppression to Enhance Anti-Tumor Immunity 

David Hou and others

Neuro-Oncology, Volume 27, Issue 9, September 2025, Pages 2355–2369, https://doi.org/10.1093/neuonc/noaf106

编译：冀培刚

免疫疗法已改写多种肿瘤的治疗标准，但胶质母细胞瘤（GBM）却因其高度免疫抑制的微环境而难以落地。厘清不同细胞间的相互作用及驱动免疫抑制的信号通路，是设计新策略的关键。近年研究揭示，尽管瘤内B细胞数量稀少，却能显著调控T细胞功能并决定检查点阻断疗效。在GBM中，肿瘤相关髓系细胞通过微囊泡及TGFβ等机制诱导B细胞向调节表型转化，导致T细胞耗竭、免疫治疗失效。因此，欲将免疫疗法成功应用于GBM，必须破解这些免疫调控机制，并构建可提升患者获益的联合方案。

来自美国芝加哥西北大学范伯格医学院神经外科的David Hou团队利用空间分辨转录组学与多重免疫荧光描绘GBM内B细胞微环境，发现髓系细胞与B细胞间TGFβ信号显著增强。通过条件性基因敲除小鼠，体内探究TGFβ信号对B细胞功能与存活的影响；并联合TGFβ阻断与PD-1抑制，评估其抗胶质瘤协同效应。

髓系细胞是GBM中经TGFβ通路与B细胞互作的主要群体。药物或基因阻断TGFβ可扩增瘤内B细胞，并与PD-1抑制协同，显著延长生存期（双药组60%小鼠肿瘤被根除）。疗效完全依赖B细胞，若清除B细胞则生存获益消失。双重αVβ8/PD-1阻断减轻B细胞对CD8⁺ T细胞毒性的抑制，促进浆母细胞分化，通过恢复B细胞功能与增殖实现胶质瘤根除；而在RagKO小鼠中疗效部分降低，提示先天免疫亦起辅助作用。

采用抗αVβ8阻断TGFβ信号可通过多重机制增强抗肿瘤免疫，其中关键一环为恢复B细胞功能并与PD-1检查点阻断协同。该协同效应确立B细胞为GBM抗肿瘤免疫的关键、但并非唯一介导者。本研究强调瘤内B细胞免疫在提升脑肿瘤免疫治疗中的核心地位。

研究的关键点：1.双重阻断显著增强胶质母细胞瘤中B细胞的抗肿瘤免疫。2.联合靶向αVβ8与PD-1在动物模型中大幅提高生存率。3.阻断TGFβ可恢复B细胞功能并强化免疫记忆。4.本研究确立B细胞是GBM抗肿瘤免疫的关键介导者，值得进一步探索多通路联合治疗。

总体而言，本研究强调在GBM中靶向B细胞免疫的重要性。双重阻断αVβ8/PD-1可增强B细胞效应功能，使其由“抑制”转为“支持”T细胞激活与分化。这一机制为后续探讨B细胞与T细胞亚群在GBM免疫治疗中的互作奠定基础。未来应进一步解析免疫微环境中B细胞免疫抑制的动态变化，并开发整合多机制的次世代疗法，以突破免疫抑制屏障。