徐州医科大学附属医院神经外科的Er Nie和江苏省人民医院神经外科的尤永平等，应用western blotting和免疫荧光检测KSRP的分布，并用芯片分析比较TGF-β1处理和未处理细胞之间长链非编码RNA的差异，进一步用RNA免疫共沉淀验证RNA与KSRP的关系；并在原位和皮下移植瘤小鼠模型中验证TGF-β1在替莫唑胺耐药的作用。结果发表于2021年3月《Neuro-Oncology》杂志。

——摘自文章章节

替莫唑胺（Temozolomide，TMZ）是治疗胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）的一线化疗药物。然而，40%左右的胶质瘤患者表现为TMZ耐药，目前认为甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（methylguanine DNA methyltransferase，MGMT）的表达是最重要的耐药机制。MGMT通过去除TMZ诱导的O6-甲基鸟嘌呤中的甲基，逆转DNA烷基化；MGMT表达水平较低的患者TMZ化疗效果明显。多种因素参与MGMT表达的调控，miR-198起源于卵泡抑素样1（FSTL1）基因的非编码区，miR-198上调通过与MGMT的3’-UTR结合增强TMZ敏感性，降低细胞MGMT水平。选择性剪接的FSTL1 mRNA可产生药物敏感的miR-198或耐药的FSTL1蛋白；然而，调节这种剪接移位的机制尚不清楚。

细胞质和细胞核中的K同源剪接调节蛋白（K-homology splicing regulatory protein，KSRP）也称为KHSRP，是含腺苷酸-尿苷酸（AU）富集元件（ARE）mRNA的重要负性调控因子。在细胞质中，KSRP通过与ARE区特异性结合促进RNA降解。在细胞核中，KSRP与原代miR结合，促进miR成熟。KSRP通过与其3’-UTR结合，剪切FSTL1 mRNA生成miR-198。此外，TGF-β1通过抑制KSRP的表达来抑制miR-198。在恶性胶质瘤中，TGF-β1广泛表达，TGF-β1活性高的GBM患者预后较差。然而，TGF-β1在TMZ耐药中的作用仍不清楚。

徐州医科大学附属医院神经外科的Er Nie和江苏省人民医院神经外科的尤永平等，应用western blotting和免疫荧光检测KSRP的分布，并用芯片分析比较TGF-β1处理和未处理细胞之间长链非编码RNA（lncRNA）的差异，进一步用RNA免疫共沉淀验证RNA与KSRP的关系；并在原位和皮下移植瘤小鼠模型中验证TGF-β1在替莫唑胺耐药的作用。结果发表于2021年3月《Neuro-Oncology》杂志。

该项研究结果发现，TGF-β1过表达有助于MGMT启动子低甲基化GBM细胞对TMZ的耐药，TGF-β1可通过抑制miR-198表达降低MGMT水平，而TGF-β1上调不影响KSRP表达。研究者鉴定2个lncRNA（H19和HOXD-AS2），它们通过Smad信号通路上调TGF-β1。H19和HOXD-AS2与KSRP的竞争性结合，阻止KSRP与初级miR-198结合，从而降低miR-198的表达。HOXD-AS2或H19上调强烈促进TMZ耐药和MGMT表达。而且，KSRP缺失消除TGF-β1和lncRNA对miR-198和MGMT的影响。最后，研究发现TGF-β1或lncRNA低水平患者可从TMZ化疗中获益。

最后作者指出，在MGMT启动子低甲基化的GBM中，TGF-β1与TMZ耐药有关。TGF-β1可上调导致长链非编码RNA（lncRNA）表达，与KSRP竞争性结合，阻止KSRP参与miR-198开关，从而降低miR-198水平，增加MGMT的表达。该研究揭示TGF-β1导致替莫唑胺耐药的潜在机制，TGF-β1可降低miR-198水平和增加MGMT积累，是TMZ耐药的机制，由此可能成为靶向GBM，克服TMZ耐药的有效目标。