日本山梨大学神经外科的Mitsuto Hanihara等发现一种用于检测甲基化DNA的高效液相色谱（high-performance liquid chromatography，HPLC）能够在短时间内快速准确地检测DNA甲基化水平。结果发表于2020年11月的《Clin Epigenetics》在线。

——摘自文章章节

胶质母细胞瘤（glioblastoma，GBM）是成人常见的高度恶性脑肿瘤，目前标准治疗方法是最大安全范围内切除肿瘤后辅以放疗和化疗，但中位生存期仅为短短的12-15个月。GBM常用的化疗药物替莫唑胺（temozolomide，TMZ），主要通过DNA鸟嘌呤O⁶位点烷基化，影响DNA复制而达到抗肿瘤疗效。O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT）可修复上述错配损伤，使化疗药物失效。MGMT启动子甲基化可以使MGMT表达受抑制，也使之成为预测TMZ治疗有效的主要标志物。大量研究已证明，MGMT启动子甲基化与TMZ治疗的胶质瘤患者预后显著相关，甚至与IDH状态无关。然而，目前尚缺乏评估MGMT甲基化的最佳方法和分析MGMT甲基化的最佳启动子区相关的共识。

图1. MGMT的CpG岛两个不同的引物区DMR 1、DMR 2和DMR 3。

该研究选取2007年至2018年在日本山梨大学神经外科接受治疗的新诊断为GBM的患者。手术切除后的肿瘤组织标本经过处理共获得28份福尔马林固定石蜡包埋（formalin-fixed paraffin-embedded，FFPE）标本和23份冷冻标本。

研究者首先比较HPLC和下一代测序（next-generation sequencing，NGS）方法测得的甲基化状态，证实HPLC与NGS测得的甲基化状态结果一致，即HPLC方法用于DNA甲基化分析有效。接着，对21例冷冻GBM标本进行HPLC分析；所有患者均可检测得MGMT启动子甲基化状态。对于区域1，甲基化的肿瘤患者的无进展生存期（progression-free survival，PFS）明显长于未甲基化的肿瘤患者（p=0.00108）；区域2，甲基化的肿瘤患者的总体生存期（overall survival，OS）（p=0.00258）和PFS（p=0.00365）明显长于未甲基化的肿瘤患者；区域3，甲基化和未甲基化的肿瘤患者生存期无统计学差异。然后，对28例FFPE GBM标本进行HPLC分析，其中26例（92.9%）在区域1检测到MGMT甲基化状态，8例（28.6%）在区域2检测到MGMT甲基化状态，21例（75%）在区域3检测到MGMT甲基化状态，区域1和区域3中甲基化和未甲基化MGMT组之间生存期无统计学差异。

研究结果显示，MGMT启动子甲基化是GBM患者最重要的标志物之一，HPLC方法可以快速有效地检测MGMT启动子甲基化状态。但该研究样本数偏少，为使HPLC方法能够成为检测MGMT甲基化状态的金标准，还需要纳入更多患者进一步研究。