烟雾病（Moyamoya disease）是一种罕见的脑血管疾病，其特点是颈内动脉（ICA）及其在Willis环内的近端分支逐渐狭窄或闭塞，导致颅底异常血管网形成。根据流行病学研究，在我国，烟雾病发病率以河南、安徽、湖北省为高（标准化发病率>1-5/100000居民/年）。目前，脑血管造影（DSA）结果是诊断烟雾病的金标准。然而，在诊断烟雾病之前，必须排除颅内动脉硬化的脑血管病，成人烟雾病早期阶段，烟雾状血管发育不全，可能观察不到典型的血管造影特征，因此成年人烟雾病与颅内动脉硬化性疾病的鉴别诊断并不直接，需要寻找新的无创的手段来帮助疾病的鉴别诊断。

简而言之，烟雾病有两大类临床表现，一类是由脑缺血引起的，包括短暂性脑缺血发作（TIA）、脑梗塞、可逆性缺血性神经功能缺损（RIND）和癫痫发作：另一类是由于应对缺血的代偿机制造成的有害后果，包括脆弱的侧支血管和微动脉瘤的破裂出血以及经硬膜血管扩张的头痛。如果不及时加以治疗，这些症状将导致患者的高致残率和死亡率。不幸的是，该病对任何药物治疗都没有反应。通过直接或间接搭桥技术进行外科血管重建是首选的治疗方法。手术的远期效果高度依赖于患者自身的血管新生能力，因此如何在手术前能判断出病人的血管重建能力对烟雾病治疗具有重大意义。

Tie-2是受体酪氨酸激酶家族中的一员，表达于血管内皮细胞，是血管生成素（Angiopoietin, Ang）的受体。Ang-Tie-2信号通路参与血管发育成熟、血管微环境的平衡稳定和血管新生等。Ang-1与Tie-2受体结合，使其磷酸化，起激活作用：Ang-2可与Ang-1竞争性结合Tie-2受体，抑制Tie-2的磷酸化，使其失活。近年来，有研究表明sTie-2的含量是肿瘤良恶性的标记，是肿瘤预后和治疗效果的评价指标；也有研究表明外周血sTie-2的含量同样也可以预测急性冠脉综合征以及充血性心力衰竭患者的预后。

本发明公开了血管生成素受体Tie-2作为烟雾病诊断生物标志物的应用，检测人外周血中可溶性Tie-2蛋白水平可以诊断烟雾病和脑动脉粥样硬化闭塞患者以及预测烟雾病患者的术后血运重建效果。本发明为烟雾病的临床诊断以及预测患者预后提供了新的手段，具有重要的临床价值和推广应用前景。

申请人提供了一种用于检测血管生成素受体Tie-2的试剂在制备烟雾病诊断器械中的应用。该试剂包括但不限于抗体和探针，其中，抗体包括单抗和多抗，可通过生物免疫反应对待测样品中的抗原进行检测；而探针则是通过分子杂交原理从基因组中将目的基因检测出来。针对已知的蛋白或基因对其进行检测属于本领域常规技术手段，针对已知序列的抗原或基因设计相应的抗体或探针对本领域技术人员而言也不存在任何技术障碍。本发明的目的并不在于提供检测Tie-2的抗体或探针，且现有技术中已有针对Tie-2的检测抗体或探针的记载。用于诊断烟雾病的器械包括但不限于基因芯片和试剂盒，前者含有用于分子杂交对目的基因进行检测的探针，后者含有用于生物免疫反应对目的蛋白进行检测的抗体。在获得探针和抗体的基础上，对基因芯片或试剂盒进行组装对本领域技术人员而言也不存任何技术障碍。

本发明可通过对人体外周血中的可溶性Tie-2进行检测进而诊断烟雾病，该检测对人体造成的创伤小，依从性高。

本发明可通过ROC曲线的截断值判断诊断结果，当检测结果低于截断值（2730pg/ml），则诊断为烟雾病并将其与颅内动脉硬化的脑血管病区分。该诊断结果准确可靠，克服了疾病诊断的主观性。

本发明通过转录组学方法鉴定并筛选出烟雾病与颅内动脉硬化的脑血管病间差异性表达因子，实现了烟雾病的快速诊断,同时还能有效预测烟雾病患者术后血运重建效果，对减少脑血管事件发生、改善预后具有重要价值和临床意义。

更详尽的技术方案参见专利文献中的具体实施例。

实施例中烟雾病患者血清中Ang-1，Ang-2，sTie-2，VEGF的蛋白含量

注：申请人招募了经常规检査诊断为烟雾病（MMD）患者36名及颅内动脉硬化的脑血管病（ACVD）患者10名，手术前采集静脉血并进行可溶性Tie-2表达量检测分析，结果发现烟雾病患者血清中存在低表达的Tie-2蛋白，与ACVD对照组相比具有显著性差异（P<0.01）。

实施例中sTie-2蛋白诊断烟雾病的ROC曲线图

注：ROC曲线进一步表明Tie-2对烟雾病具有可观的诊断能力，综合前述的试验结果，表明Tie-2蛋白可以作为标志物用于烟雾病诊断。

实施例中术后不同血运重建效果患者血清中Ang-1、Ang-2、sTie-2、VEGF蛋白含量

注：共收集到了29名烟雾病患者术后6个月随访的DSA数据，其中16人血运重建的效果良好，13人血运重建的效果不好；对试验前血清中Ang-1、Ang-2、sTie-2、VEGF的水平进行评估，结果发现血运重建好的烟雾病患者血清中存在低表达的sTie-2蛋白，与血运重建差的POOR组相比具有显著性差异（P<0.01），提示sTie-2蛋白可以作为预测烟雾病预后的生物标志物。

实施例中sTie-2蛋白用来判断烟雾病患者术后血运重建效果的ROC曲线图

注：利用ROC曲线分析sTie-2预测烟雾病预后的价值（AUC0.83，95%CI 0.49-0.96，敏感性93.8%，特异性69.2%，截断值<2512pg/ml），提示sTie-2可以用来预测术后血运重建效果。