首都医科大学附属北京天坛医院的赵继宗院士等通过CyTOF发现IA患者存在循环免疫功能障碍；结果发表在2022年6月的《Frontiers in Immunology》在线。

——摘自文章章节

免疫和炎症可能在颅内动脉瘤（IA）形成中起关键作用。分析IA的基因表达显示患者存在多个促炎基因上调的因素。在动物模型中可通过炎症反应调控IA的发展。循环免疫细胞与IA的形成和破裂相关。有关IA外周血单个核细胞（PBMC）中特异性免疫细胞分类研究仍然缺乏。PBMC的表型具多样性，难以描述所有免疫细胞亚群的变化，高通量质谱流式细胞术（CyTOF）可能克服此难题，显示血管疾病的免疫特征。首都医科大学附属北京天坛医院的赵继宗院士等通过CyTOF发现IA患者存在循环免疫功能障碍；结果发表在2022年6月的《Frontiers in Immunology》在线。

该研究纳入26例IA患者和20例年龄性别匹配的健康者对照（HC）。采集参与者的空腹外周静脉血，通过密度梯度离心分离PBMC，使用细胞表面和胞内标记对PBMC进行染色。预处理后，每个样本的单核细胞数据通过手动圈门从Cytobank导出。然后对数据进行归一化处理，利用PhenoGraph分析高通量数据。使用T-分布随机近邻嵌入（t-SNE）降维算法进行高通量数据的二维可视化，显示两组之间聚类和标记表达的频率和异质性变化。合并相似表型特征的细胞亚群，导出每个细胞亚群的标记表达水平和细胞计数，在R软件中进行统计分析。

根据标记表达模式将CD45+ PBMC分为28个细胞亚群。这28个细胞亚群属于8个细胞谱系，包括CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD8+双阳性T细胞（DPT）、CD4-CD8-双阴性T细胞（DNT）、B细胞、NK细胞、树突状细胞（DC）和单核细胞。与HC组相比，IA组B细胞和单核细胞的比例较高，CD8+T细胞、DNT细胞和DPT细胞的比例较低。CD4+T细胞、NK细胞和DC的频率没有显著差异。

IA组CD4+T细胞中的TLR4、PD1、p-STAT3、CD25、CD45RO、HLA-DR、CXCR3、CX3CR1、CCR4、CCR10和IL-17A的表达水平高于HC组；GP130、CD11b、CD27、CD56、CXCR5、CCR6、FOXP3和IL-10的水平低于HC组。分析CD4+T细胞亚群，IA组C02（CD27+CD4+Tem）、C03（HLA-DR+CD4+Tn）、C05（CD27-CD4+Tem）和C17（HLA-DR+CD4+Tcm）的比例增加，C09（HLA-DR-CD4+Tn）、C11（Treg细胞）、C26（CXCR5+CD4+Tem）和C27（HLA-DR-CD4+Tcm）减少。此外，与HC相比，IA患者Treg细胞中TLR4、PD1、p-STAT3和HLA-DR的表达水平较高，而IA患者中GP130、Foxp3和IL-10的表达水平低于HCs。

与HC组相比，IA组CD8+T细胞的比例显著降低。IA组CD8+T细胞中的TLR4、PD1、p-STAT3、CD25、CD45RA、CD45RO、HLA-DR、CXCR3、CX3CR1、CCR4和CCR10的表达水平高于HC组；而IA组的GP130、CD11b、CD27、CXCR5、CCR6和IL-10的表达水平低于HC组。IA组的C12（CD3+CD8+CD19+细胞）、C13（HLA-DR-CD8+Tn）、CD19（HLADR+CD8+Tn）和C23（CD8+Tcm）的比例低于HC组。

与HC组相比，IA组的DPT比例显著降低。IA组DPT细胞中的PD1、p-STAT3、CD25、CD45RO、HLA-DR、CXCR3、CX3CR1、CCR4和CCR10的表达高于HC组，IA组的GP130、CD11b、CD27、CXCR5、CCR6和IL-10水平低于HC组。IA组的DNT细胞比例显著降低；IA组TLR4、PD1、p-STAT3、CD11c、CD25、CD27、CD45RA、CD45RO、HLA-DR、CXCR3、CX3CR1、CCR4、CCR7和CCR10在DNT细胞中的表达水平高于HC组，CD11b和CCR6水平低于HC组。

IA组患者的B细胞占比高于HC组；IA组B细胞中TLR4、PD1、pSTAT3、CD27、CD34、CD45RA、CD45RO、CXCR3、CX3CR1、CCR4、CCR7、CCR10和IL-10的表达水平高于HC组，而CD11b、CCR6、HLADR和CXCR5水平低于HC组。在B细胞的三个亚群中，患者组C04（CD34+B细胞）和C08（CD27+B细胞）的比例较高，而C28（CD27-B细胞）的比例比HC组低。IA组和HC组之间NK细胞的比例无差异。C01（高细胞毒性NK细胞）和C25（低细胞毒性NK细胞）在各组之间没有显著差异。

与HC组相比，IA组患者的单核细胞百分比增加。IA组单核细胞中p-STAT3、CD11c、CD14、CD45RA、CD45RO、CXCR3、CX3CR1和HLA-DR的表达水平高于HC组，而GP130、CD11b、CD15、CD16、CD68、CD163和CXCR5水平低于HC组。此外，IA组的C07（CD14+CD16-单核细胞）和C18（CD14+CD16+单核细胞）的比例显著高于HC组。与HC组相比，IA组DC的比例没有明显增加。此外，IA组DC细胞中TLR4、PD1、p-STAT3、GP130、CD11c、CD45RA、CD45RO、CXCR3和CX3CR1的表达水平高于HC组，IA组中C21（经典DC）的比例显著高于HC组。

综上所述，该研究发现，IA患者存在循环免疫功能障碍，CD4+T细胞亚群失调，B细胞和单核细胞增加，CD8+T细胞、DNT细胞和DPT细胞减少；IA与淋巴和单核细胞免疫激活增强有关，其中HLADR、CXCR3和CX3CR1的表达增加；此外，IA患者的T细胞、B细胞和NK细胞中TLR4、p-STAT3和衰竭标志物PD1的表达增加。该研究全面揭示IA患者的循环免疫细胞景观，循环免疫功能障碍可能在IA的发展中具有潜在作用。