血栓成分与静脉溶栓和机械取栓的预后有明显的相关性，对血栓成分的研究有助于对患者采用个体化的治疗方案。我们首先要对血栓的成分进行准确的分析，并且明确血栓的成分和其在影像上表现之间的相关性。

【Ref：Fitzgerald ST, et al. J NeuroIntervent Surg 2019;0:1–5. doi:10.1136/neurintsurg-2018-014637.】

当前对急性缺血性卒中血栓特征的研究主要集中在纤维蛋白和红细胞上。很少关注血栓的血小板组成。由于HE染色无法准确区分纤维蛋白和血小板，因此我们用MSB染色法测定血栓成分，评估血小板密度和平扫CT（NCCT）密度之间的关系。

如果患者年龄大于18岁，接受了AIS的机械血栓切除术治疗，并在血管内治疗前进行了NCCT检查，则纳入本研究。单用rt-pa治疗的患者、血管内治疗前未行NCCT的患者以及数据不完整的患者被排除在研究之外（见图1）。使用MSB染色法对收集的血栓进行组织病理学分析，利用轨道图像分析（www.orbit.bio）对血栓的成分进行定量分析。在取栓之前，每个病人都进行了NCCT检查，并测量了每个血栓的CT密度。血栓和临床信息的相关性采用卡方检验进行分析。

图1. 患者入组流程图

一共入组了85例患者，临床特点见表1。患者的血栓采用MSB染色，而非HE染色，因为前者可更准确的显示血栓成分（见图2）。免疫荧光染色证实了MSB染色识别血小板富集区的能力，表明在被MSB染色识别为富含血小板的区域存在血小板，与使用抗血小板（CD42B）抗体检测到的结果一致（见图3）。血栓的主要成分在患者队列中是不均匀的，如图4所示。血栓的平均血小板密度为15.7%（2.5-72.5%）。富血小板血栓与NCCT非高密度存在显著相关性（ρ=0.321，P=0.003*，N=85）。血小板在血栓中所占的百分比与HU值呈显著的负相关（ρ=-0.243，p=0.025*，n=85）（见图5）。一例说明性病例见图6。

表1. 患者的临床特点

图2. MSB和HE染色血栓的比较。（A）和（C）是MSB染色玻片，显示存在红细胞（黄色）、白细胞（蓝色）、纤维蛋白链（红色）和血小板（灰色，用黑色箭头标识）。（B）和（D）是HE染色的玻片，从同一个血栓上取下的，显示有红细胞（红色）、白细胞（蓝色）和纤维蛋白/血小板（紫色）。

图3. 免疫荧光染色证实血栓中存在富血小板区。（A）一张MSB染色玻片的低倍放大图像（4x），显示血栓中存在纤维蛋白链（红色）、红细胞（黄色）、白细胞（蓝色）和血小板（灰色）。（B-D）免疫荧光图像显示（B）有核细胞（DAPI，蓝色）、（C）血小板（CD42b，红色）和（D）纤维蛋白原（绿色）。（E）一个合并的免疫荧光图像，显示血小板与纤维蛋白原（黄色）共定位。

图4. 患者的血块血栓成分。这是由MSB染色确定的队列中每个患者的组织学血栓成分的图形表示，代表红细胞（黄色）、白细胞（蓝色）、纤维蛋白链（红色）和血小板（灰色）的百分比。

图5. NCCT上血小板/其他成分百分比与HU值之间的相关性。观察到血小板百分比与NCCT上的平均HU值呈显著的负相关（ρ=-0.243，p=0.025*，n=85）。

图6. NCCT上等密度的富血小板血栓示例。（A）机械取栓术前患者的NCCT图像。左颈内动脉（ICA）终末和大脑中动脉（MCA）M1支未见高密度动脉征。（B）机械取栓术前患者的数字减影血管造影（DSA）图像，显示ICA终端和MCA闭塞。（C）机械取栓后完全血运重建（TICI3）的DSA图像。（D）甲醛固定后的血栓照片。（E和F）血栓MSB染色载玻片的低（0.5x）和高（40x）放大图像，显示血栓内存在富血小板区（34.6%血小板，灰色）。

MSB染色可以鉴别出富含血小板的血栓，NCCT上富血小板血栓是等密度的。