急性缺血性脑卒中（Acute Ischemic Stroke，AIS），是临床上最常见的脑血管疾病之一。其病理特征在于脑组织因缺血导致不可逆的损伤（即梗死核心），并伴随存在可挽救潜力的缺血半暗带。为了选取恰当的治疗方案，如溶栓或机械取栓，及时且准确地判断AIS的发病时间窗至关重要。然而，目前的诊断方法主要依赖于患者的临床症状、自述发病时间，以及影像学检查，但这些方法存在主观性强、检测时间长等局限性。因此，亟需开发一种快速、客观的生物标志物，用于预测AIS的发病时间窗，以辅助临床诊断和治疗决策。

缺血性半暗带是AIS管理的一个核心概念，指血流减少但仍具有恢复潜力的大脑区域，与已无法存活的梗塞核心区形成对比。目前，诸如计算机断层扫描灌注（CTP）和磁共振成像（MRI）等先进成像技术，在识别可挽救的脑组织和指导治疗决策方面发挥着关键作用。具体而言，MRI的弥散加权成像（DWI）和液体衰减反转恢复（FLAIR）序列对诊断和治疗决策至关重要。DWI上的高信号但在FLAIR上没有出现相应的信号区域，通常表明存在缺血半暗带，其中的组织可能仍可挽救；而DWI和FLAIR上均出现高信号，则可能代表梗塞核心，表明不可逆损伤和再灌注治疗获益的可能性降低。然而，这些成像技术不仅需要患者到指定地点进行检查，还可能需要注射对比剂（如CTP），准备过程复杂且耗时。此外检查的主观性及对专业设备和技术的需求，使其在某些临床环境中不易普及，尤其是在资源匮乏的地区。

因此，寻找一种能够实时反映AIS不断发展的病理生理学的快速且可靠的生物标志物是迫切需求的。这种生物标志物不仅能增强临床决策能力，特别是在关键的中风后6~24小时内，而且能够及时采取有针对性的干预措施，以挽救缺血半暗带，从而改善长期神经系统结果。

本发明属于检验医学技术领域，具体涉及RCAN1蛋白作为急性缺血性脑卒中AIS生物标志物的用途。本发明提供了一种预测急性缺血性脑卒中AIS发病时间窗或用于评估急性缺血性脑卒中AIS患者缺血半暗带的体积的方法，包括以下步骤：

a)采集疑似急性缺血性脑交中AIS患者的血浆样本；

b)检测血浆样本中RCAN1蛋白浓度；

c)根据RCAN1蛋白的血浆水平，预测患者的急性缺血性脑卒中AIS发病时间窗或评估急性缺血性脑卒中AIS患者缺血半暗带的体积。

其中，以上所述RCAN1蛋白在急性缺血性脑卒中AIS患者血浆样本中的表达水平呈现特定动态变化：在6~24小时窗口期达到峰值；在<6小时和>24小时的时间段，RCAN1的诊断效能下降。并且，所述RCAN1蛋白在急性缺血性脑卒中AIS患者血浆样本中的表达水平与大脑中缺血半暗带体积呈正相关关系。

以上步骤b)中所述血样中RCAN1蛋白水平的检测方法包括酶联免疫吸附试验ELISA、电化学发光免疫分析、蛋白质印迹和质谱分析。以上步骤d)还可根据预测的发病时间窗或评估的缺血半暗带体积，决定是否对急性缺血性脑交中AIS患者进行溶栓/取栓治疗，以及制定个性化的治疗方案。

对应的，本发明还提供了一种用于预测急性缺血性脑卒中AIS发病时间窗或用于评估急性缺血性脑卒中AIS患者缺血半暗带的体积的系统，包括：

a)血液采集装置，用于采集疑似急性缺血性脑卒中AIS患者的血样；

b)RCAN1蛋白检测模块，检测血浆样本中RCAN1蛋白浓度；

c)数据处理模块，根据RCAN1蛋白的血浆水平，预测患者的AIS发病时间窗或评估急性缺血性脑卒中AIS患者缺血半暗带的体积

d)输出模块，显示预测/评估结果和治疗建议。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

√ 本发明首次发现RCAN1蛋白在AIS患者的血浆中显著升高，且其水平与发病时间窗具有明确的动态变化特征，尤其在6~24小时窗口期具有最佳的诊断效能，同时，本发明还发现RCAN1蛋白在急性缺血性脑卒中AIS患者血浆样本中的表达水平与大脑中缺血半暗带体积呈正相关关系，这一发现为RCAN1作为血液标志物预测AIS发病时间窗及治疗靶点提供了重要依据。

√ 将RCAN1蛋白作为生物标志物用于检测急性缺血性脑卒中AIS的发病时间窗或评估大脑中缺血半暗带体积，其检测方法快速、非侵入性，能够显著提高AIS患者的诊断效率，为治疗决策提供重要参考，具有广阔的应用前景。

本发明确定RCAN1蛋白作为AIS患者血液生物标志物的实验设计思路

通过Spearman相关性分析评估AIS患者（n=10）血浆RCAN1蛋白水平与缺血半暗带体积的相关性图