液体活检（liquid biopsies）是一种可随着时间和治疗方式去诊断和监测肿瘤发生发展的检测方法。目前一些实体瘤中已经可以应用cfDNA检测TERT启动子突变位点（C228T，C250T），尽管在约60%的胶质瘤组织中存在TERT启动子突变，但液体活检技术目前尚未在胶质瘤中得到充分的证实。

  本研究开发了一种新的数字PCR（ddPCR）检测方法，该方法可以同时检测神经胶质瘤患者血浆中的两个TERT启动子突变位点（C228T和C250T）。通过对157名胶质瘤患者的分析验证了这种检测方法对检测血浆中TERT启动子突变的敏感性和特异性。

  在同一肿瘤组织样品中，使用ddPCR检测方法检测TERT启动子突变结果与临床病理实验室评估结果完全一致。在同一肿瘤样本中，与组织样本检测的TERT启动子突变对比，液体活检检测的总体敏感性为62.5％，特异性为90％。

  研究还对5例患者进行术后监测，监测结果显示 2例患者（p1，p2）TERT启动子突变频率一直低于阈值，临床诊断显示患者疾病稳定。3例患者（P3，P4，P5）在放化疗后在MR图像上出现了增强对比的病变。 P4和P5具有进展的组织病理学证实，而P3具有临床诊断的进展。结果显示外周血监测TERT启动子突变频率可以反映肿瘤的临床过程，其突变频率在手术干预和治疗后降低，并随肿瘤进展而增加。

  本研究证明了该检测方法可在脑胶质瘤诊断和监测的背景下以高灵敏度和特异性检测cfDNA中的TERT启动子突变。证明了cfDNA检测脑胶质瘤TERT启动子突变在临床上的可行性。

图1 ddPCR技术检测TERT启动子突变实验方案的概述和优化

图2 血液中TERT启动子突变的检测验证

图3 5例胶质瘤患者TERT启动子突变的监测与疾病进展情况

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